熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。
熒光分光光度計(jì)的基本原理:
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過(guò)濾過(guò)和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。 物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過(guò)程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級(jí)的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來(lái)定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。
熒光分光光度計(jì)的特點(diǎn):
靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
對(duì)于重金屬元素的檢測(cè),實(shí)驗(yàn)室大多采用以下幾種方法進(jìn)行:原子吸收法、原子熒光法、ICP-AES、ICP-MS、分光光度法等。可以看到,除了分光光度法外,其余測(cè)試方法大多為大型實(shí)驗(yàn)室分析儀器設(shè)備。在擁有高靈敏度,良好的重復(fù)性和準(zhǔn)確性等優(yōu)點(diǎn)之外,它們也呈現(xiàn)出諸如采購(gòu)成本高、體積大、操作和使用復(fù)雜、日常運(yùn)營(yíng)費(fèi)用高等問(wèn)題。在一些大型檢測(cè)機(jī)構(gòu)和中心實(shí)驗(yàn)室,這些缺點(diǎn)往往可以克服,但對(duì)于中小型檢測(cè)網(wǎng)點(diǎn),要采購(gòu)和使用這些專(zhuān)業(yè)設(shè)備是相當(dāng)困難的。分光光度法相對(duì)比較簡(jiǎn)單,使用成本也較低,雖然也能夠?qū)崿F(xiàn)重金屬離子的檢測(cè),但其檢測(cè)限往往很高,對(duì)于痕量重金屬的分析往往無(wú)能為力。
三 、溶出伏安法測(cè)定茶葉中重金屬(鉛鎘)的含量
1. 測(cè)量原理是什么?
SJB-801便攜式重金屬分析儀采用電化學(xué)陽(yáng)極溶出伏安法原理檢測(cè),可進(jìn)行多種金屬離子的檢測(cè)。陽(yáng)極溶出伏安法測(cè)定主要分兩個(gè)步驟:首先是“電析”,即在一個(gè)恒電位下,待測(cè)離子進(jìn)行電解沉積,此階段電極上發(fā)生還原反應(yīng),然后是溶出,在富集結(jié)束后,施加一個(gè)反向電壓,將電位由負(fù)向正的方向掃描,使富集在電極上的物質(zhì)氧化溶出回歸溶液中,產(chǎn)生氧化反應(yīng)。記錄電壓電流曲線,峰面積與重金屬離子的含量呈線性關(guān)系,進(jìn)行定量分析,峰值電位作為定性分析的依據(jù)。
隨著技術(shù)的發(fā)展,基于溶出伏安法的重金屬分析儀得到了很好的發(fā)展。一方面實(shí)現(xiàn)了測(cè)試過(guò)程的“傻瓜化”,廠商往往會(huì)將測(cè)試方法內(nèi)置在檢測(cè)儀器里,并配套相應(yīng)的測(cè)試試劑和樣品前處理方法,使得沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)的操作人員也能很容易地掌握和操作;另一方面,無(wú)汞測(cè)量技術(shù)的開(kāi)發(fā),使得傳統(tǒng)的汞膜測(cè)試技術(shù)逐漸被替代,使陽(yáng)極溶出伏安法的測(cè)試安全性得到了提升。







